Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型白血病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失人体内自身抗微到消失1改进型冠心病医学疼痛的实质性率在幼儿初期就有更好的描述，多个人体内自身抗微阴性的幼儿中都有70%在血清转换后10年中中风冠心病，而随访15年的幼儿这一比例减小到84%。比起之下，占去医学1改进型冠心病一半以上的改进型1改进型冠心病的中风机制还无法得到充份的深入研究。

越来越多的人开始使用分期系统来定义1改进型冠心病的实质性：个微在消失多种人体内自身抗微时进到第1先决条件，消失血糖诱发时进到第2先决条件，消失疼痛时进到第3先决条件。一些多发人体内自身抗微阴性的个微，在1期和2期，实质性较慢，并发展为中风的1改进型冠心病。我们前描述了一第一组在首次探测到多种人体内自身抗微比对后至少10年无冠心病的较快实质性者，这第一组高血压000人少，但外观上相当明确。随后，我们发现人体内自身抗体特异性CD8+T细胞核底物在实质性快速的高血压中都基本不存有，但在早先中风和长期存有的冠心病高血压中都很更容易探测到。这有可能表明，与实质性高血压比起，这些高血压诱发底物的缓冲增强。

早期深入研究表明，尽管缓冲性T细胞核(Treg)数量长短时间，但冠心病高血压存有一些机制缺陷，其中都以外对IL-2的底物灵活性降低。此外，冠心病高血压中都的畸变CD4+T细胞核有可能对缓冲不具抵抗性，显出为畸变T细胞核的消除减弱，自然产生的Treg和微外产生的抑制Treg，以及抗体经历的CD4+T细胞核中都IL-2底物减弱。本深入研究的用以是描述了CD4+缓冲性T细胞核(Treg)在一小群极快速实质性者中都的外观上，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访短时间为18-32年。

方法：BOX深入研究是一项以人群为基础的纵向深入研究，在21岁请注意确诊的高血压亲属中都检查1改进型冠心病的危险因素。我们前描述了长期快速实质性者的外观上，他们保持多重人体内自身抗微阴性超过10年，但无法消失冠心病的医学疼痛，慢性或非进行时性诱发。随后，10名再次保持无冠心病并不愿提供大量血液比对的快速实质性者扩及T和B细胞核机制归纳。在目前的深入研究中都，8名慢实质性者(SP第一组)，中都位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的人体内自身抗微阴性。所有的参与者都始终保持1改进型冠心病实质性的1期，尽管一些人随后失去了人体内自身抗微对某些抗体的阴性底物，然而，一名高血压已经始终保持2期至少6年，但无法消失医学疼痛，一名高血压被诊断为冠心病，该测试者72岁，在通过推论实验比对时，其HbA1c升高到53 mmol/mol(7%)，在数据归纳中都对该供微进行时了单独分析。分立外周血单个核细胞核(PBMCs)，引入多数值流式细胞核法术和T细胞核消除试验中分析供微中都Treg的kHz、表改进型和机制。使用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、总括和回归)进行时无监督聚类归纳，分析Treg表改进型。

结果：与肥胖供微比起，来自慢实质性微的梦境CD4+T细胞核的监督聚类说明了，激活的梦境CD4+ TregkHz减小，与抑制作用抑制的TNFR关的蛋白(GITR)强调减小有关。一名HbA1c升高的高血压与实质性快速者和反之亦然的样本比起，Treg磬有所各有不同。机制归纳表明，与肥胖供微比起，来自快速实质性微的Treg抑制的CD4+畸变T细胞核消除明显受损。显出为对畸变CD4+T细胞核CD25和CD134强调的消除减小。

平面图1 深入的表改进型归纳说明了，CD4+Treg亚改进型在慢实质性队列中都减小。由FlowSOM生成的Treg过道，聚集在来自所有供微的活CD4+CD45RA -细胞核上。根据上面物强调鉴定出有10个元簇:梦境T细胞核_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞核;HLA-DR + GITR +梦境T细胞核;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)使用9个各有不同Treg上面生成的10个元簇的MST。每个键值推选一个战斗群(100个战斗群)，更大的元战斗群(10个元战斗群)在键值第一组周围上色。每个键值中都的饼平面图说明单个上面的强调级别。(b)每个元聚类的热平面图，以说明了整微上面强调。(c, d)为HD第一组(c)和SP第一组(d)生成平面图，以及FlowSOM标识的每个元簇的表层。(e-l)比较稀土元素为每个metacluster箱终点站平面图(稀土元素> 0.05%)考虑到为HD和SP第一组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞核(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞核(l)。黄色带子推选慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩检验。此键适用于平面图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

平面图2 使用CITRUS的预测模改进型证实，TregkHz的减小是实质性快速的标志。国际标准关的联(a - f)和葡萄归纳(g-k)比较SP参与者和反之亦然的HD参与者在CD4+CD45RA−T细胞核上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群微的纪念性平面图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR强调进行时分立，演示FlowSOM群微。(b) HD(黑点)和SP(蓝点)第一组以及供微SP 606(黄色)中都CD25+ cd127的kHz汇总平面图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+关的联集合的箱终点站平面图;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3强调准确度着色，左下角出有彩的簇被标识为SP和HD队列间的各有不同。(j)箱终点站平面图说明了了在SP(蓝点)和HD(灰点)第一组中都，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的比较稀土元素(比例)。(k)直方平面图说明了每个簇的表改进型(粉红色)和Treg上面比较强调与背景强调(金色);上列，文件系统Treg_3;后面几天后，文件系统Treg_4。背景与所有其他簇中都上面的强调有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon选取符号秩检验

平面图3 与肥胖献血者比起，实质性快速者梦境treg的GITR减小。每个梦境CD4+T细胞核元簇(梦境T细胞核_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞核;HLA-DR + GITR +梦境T细胞核;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个强调上面的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的强调热平面图(sp606不以外在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇中都所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(黄色)的FlowSOM GITR强调串联，说明了直方平面图(c)和汇总平面图(d)。Wilcoxon选取符号秩和检验，p< 0.07(黄色)所有供微以外，p< 0.05(金色)供微SP 606和反之亦然的HD不以外在测试中都。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中都GITR强调，从国际标准关的联，从所有HD(灰色)、所有SP(金色)和SP 606(黄色)串联，说明了直方平面图(e)和汇总平面图(f) *p< 0.05, Wilcoxon选取符号秩检验

平面图4 来自快速实质性的CD4+ treg细胞核控制畸变CD4+T细胞核的灵活性降低。SP第一组用金色的终点站和带子说明，HD第一组用黑色的终点站和带子说明，黄色的终点站/带子说明供微sp606。使用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核进行时分选。CD4+CD25−(接收者者)被上面为CFSE, Treg按推论的比例滴定。用抗CD3 /28微珠再生细胞核，人才培养3天后进行时流式细胞核法术探测。(a-d)与CD4+接收者者比较应的treg人才培养(自微)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD接收者者人才培养。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE消除比率(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的消除比率。使用阴性对照(激活的拥护细胞核不含treg)计算消除比率。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

平面图5 畸变CD4+T细胞核对快速实质性的T细胞核再生的消除更极端。SP第一组用金色的终点站和带子说明，HD第一组用黑色的终点站和带子说明，黄色的终点站/带子说明供微sp606。使用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞核进行时分选。CD4+CD25−(接收者者)被cfsel上面，treg按推论的比例滴定。用抗CD3 /28微珠再生细胞核，人才培养3天后进行时流式细胞核法术(CD25反染)和细胞核因子归纳。HD Treg与HD、SP或sp606接收者者都由人才培养。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE消除百份(b)。(c,d) CD25消除百份(c)和CD134消除百份(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共人才培养中都的强调。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差归纳。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

假设：我们得出有的假设是，来自快速实质性子的再生梦境CD4+Treg在GITR强调中都得到了扩展和丰富，强调了进一步深入研究Treg在1改进型冠心病风险个微中都的异质性的必要性。

原文出有处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28