Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展到

从第一次出现人体内自身免疫到出现1M-心血管疾病流行病学病症的的发展亲率在幼儿时期就有很好的刻画，多个人体内自身免疫白血病的幼儿当中有70%在血清转换后10年内患上心血管疾病，而随访15年的幼儿这一比率缩减到84%。比起之下，占流行病学1M-心血管疾病一半以上的M-1M-心血管疾病的发病前提还没有获得充分的研究成果。

愈加多的人开始适用再行系统会来定义1M-心血管疾病的的发展：形态在出现多种人体内自身免疫时转到第1期中，出现食欲反常时转到第2期中，出现病症时转到第3期中。一些多发人体内自身免疫白血病的形态，在1期和2期，的发展较相比较慢，并发展为发病的1M-心血管疾病。我们先前刻画了一小组在首次监测到多种人体内自身免疫试样后至较少10年无心血管疾病的短时间的发展者，这小组病症伤亡人数较少，但特性相当明确。随后，我们发现人体内自身肝细胞特异性CD8+T中央线粒体化学反应在的发展加速的病症当中基本不存在，但在近期发病和长期存在的心血管疾病病症当中很较易监测到。这可能表明，与的发展病症比起，这些病症胃溃疡化学反应的调节增强。

早期研究成果表明，尽管调节性T中央线粒体(Treg)数量短时间，但心血管疾病病症存在一些动态缺失，其当中还包括对IL-2的化学反应潜能减较少。此外，心血管疾病病症当中的不稳定性CD4+T中央线粒体可能对调节格外具抵抗性，观感为不稳定性T中央线粒体的抑制作用消退，自然地归因于的Treg和体外归因于的诱导Treg，以及肝细胞历程的CD4+T中央线粒体当中IL-2化学反应消退。本研究成果的目的是刻画了CD4+调节性T中央线粒体(Treg)在一个大极加速的发展者当中的特性，他们的同期为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

工具：BOX研究成果是一项以人群结合的纵向研究成果，在21岁此表确诊的病症长子女当中核对1M-心血管疾病的致命诱因。我们先前刻画了长期加速的发展者的特性，他们保证多重人体内自身免疫白血病较少于10年，但没有出现心血管疾病的流行病学病症，相比较慢性或非顺利完成性胃溃疡。随后，10名继续保证无心血管疾病并愿意提供大量血液试样的加速的发展者纳入T和B中央线粒体动态比对。在迄今的研究成果当中，8名相比较慢的发展者(SP小组)，当中位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的人体内自身免疫白血病。所有的行动者都东南面1M-心血管疾病的发展的1期，尽管一些人随后保住了人体内自身免疫对某些肝细胞的过敏原，然而，一名病症现在东南面2期至较少6年，但没有出现流行病学病症，一名病症被诊断为心血管疾病，该患者72岁，在采集实验试样时，其HbA1c上升时到53 mmol/mol(7%)，在数据比对当中对该遗传物质顺利完成了分开评估。分离外周血单个核中央线粒体(PBMCs)，采用多值流式中央线粒体忍术和T中央线粒体抑制作用次测试评估遗传物质当中Treg的频五音、观感M-和动态。适用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、密切相关和重生)顺利完成无统筹聚类比对，评估Treg观感M-。

结果：与健康遗传物质比起，来自相比较慢的发展体的遗忘CD4+T中央线粒体的统筹聚类辨识，酪氨酸的遗忘CD4+ Treg频五音缩减，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)理解缩减有关。一名HbA1c上升时的病症与的发展加速者和匹配的对照小组比起，Treg五音各不相同。动态比对表明，与健康遗传物质比起，来自加速的发展体的Treg激活命的CD4+不稳定性T中央线粒体抑制作用明显受损。观感为对不稳定性CD4+T中央线粒体CD25和CD134理解的抑制作用缩减。

布1 深入的观感M-比对辨识，CD4+Treg亚M-在相比较慢的发展表头当中缩减。由FlowSOM降解的Treg室，聚集在来自所有遗传物质的活命CD4+CD45RA -中央线粒体上。根据上标物理解鉴定出10个元簇:遗忘T中央线粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T中央线粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T中央线粒体;文件系统Treg_1;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;和文件系统Treg_4。(a)适用9个不同Treg上标降解的10个元簇的MST。每个结点都有一个集群(100个集群)，格外大的元集群(10个元集群)在结点小组周围着色。每个结点当中的年糕布暗示单个上标的理解行政级别。(b)每个元聚类的热布，以辨识连续性上标理解。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)降解布，以及FlowSOM鉴别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对来说总质量为每个metacluster装有中央线布(总质量> 0.05%)明确为HD和SP小组:文件系统Treg_2 (e),文件系统Treg_3 (f),文件系统Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T中央线粒体(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T中央线粒体(l)。橙色圆圈都有这些年来SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对暗示法秩验。此键适用于布形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

布2 适用CITRUS的预测模M-证实，Treg频五音的缩减是的发展加速的标志。分级除此以外(a - f)和玉米比对(g-k)相比较SP行动者和匹配的HD行动者在CD4+CD45RA−T中央线粒体上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会群体的都有性布。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解顺利完成分离，模拟FlowSOM社会群体。(b) HD(白点)和SP(杂色)小组以及遗传物质SP 606(橙色)当中CD25+ cd127的频五音概述布。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外集合的装有中央线布;(c) HLA-DRloGITR−(文件系统Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(文件系统Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(文件系统Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+文件系统T cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，标记突出的簇被鉴别为SP和HD表头之间的不同。(j)装有中央线布辨识了在SP(杂色)和HD(灰点)小组当中，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相对来说总质量(比率)。(k)直方布辨识每个簇的观感M-(粉红色)和Treg上标相对来说理解与或多或较少理解(橙色);上列，文件系统Treg_3;下面一行，文件系统Treg_4。或多或较少与所有其他簇当中上标的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对暗示法秩验

布3 与健康献血者比起，的发展加速者遗忘treg的GITR缩减。每个遗忘CD4+T中央线粒体元簇(遗忘T中央线粒体_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T中央线粒体;HLA-DR + GITR +遗忘T中央线粒体;文件系统Treg_2;文件系统Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)监测每个理解上标的变异。(a,b)来自HD (a)和S (b)表头的理解热布(sp606不还包括在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇当中所有HD(灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(橙色)的FlowSOM GITR理解串联，辨识直方布(c)和概述布(d)。Wilcoxon配对暗示法秩和验，p< 0.07(橙色)所有遗传物质还包括，p< 0.05(橙色)遗传物质SP 606和匹配的HD不还包括在测试当中。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs当中GITR理解，从分级除此以外，从所有HD(灰色)、所有SP(橙色)和SP 606(橙色)串联，辨识直方布(e)和概述布(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对暗示法秩验

布4 来自加速的发展的CD4+ treg中央线粒体控制不稳定性CD4+T中央线粒体的潜能减较少。SP小组用橙色的中央线和圆圈暗示，HD小组用金色的中央线和圆圈暗示，橙色的中央线/圆圈暗示遗传物质sp606。适用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T中央线粒体顺利完成分选。CD4+CD25−(接收者者)被上标为CFSE, Treg按判读的比率起始。用抗CD3 /28微珠激活命中央线粒体，培育出3当晚顺利完成流式中央线粒体忍术监测。(a-d)与CD4+接收者者相对来说应的treg培育出(继发性)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD接收者者培育出。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑制作用一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑制作用一般而言。适用白血病对照(酪氨酸的响应中央线粒体另有treg)计算抑制作用一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

布5 不稳定性CD4+T中央线粒体对加速的发展的T中央线粒体激活命的抑制作用格外敏感。SP小组用橙色的中央线和圆圈暗示，HD小组用金色的中央线和圆圈暗示，橙色的中央线/圆圈暗示遗传物质sp606。适用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T中央线粒体顺利完成分选。CD4+CD25−(接收者者)被cfsel上标，treg按判读的比率起始。用抗CD3 /28微珠激活命中央线粒体，培育出3当晚顺利完成流式中央线粒体忍术(CD25反染)和特异性比对。HD Treg与HD、SP或sp606接收者者共同培育出。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑制作用百分亲率(b)。(c,d) CD25抑制作用百分亲率(c)和CD134抑制作用百分亲率(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培育出当中的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重相比较测试

结论：我们得出的结论是，来自加速的发展长子的激活命遗忘CD4+Treg在GITR理解当中获得了拓展和丰富，强调了实质性研究成果Treg在1M-心血管疾病风险形态当中的异质性的必要性。

原文当中有：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28